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工業微生物菌種選育的步驟有哪些?有這些方法來進行分離和純化!

作者:樂診生物技術發布時間:2020-11-19 08:59:09瀏覽量:0
  工業微生物菌種在使用之前,往往需要經歷選育這個步驟,目的是為了能夠挑選到更適合我們使用的微生物菌種,那么選育的步驟是什么呢?分別是采樣、增殖培養、純種分離、以及生產性能的測定等等幾個步驟。并且在使用的時候,還需要對所選用的菌種進行分離和純化。在文章中,小編就圍繞著工業微生物菌種選育的步驟,以及它的分離和純化這兩方面來給大家做一個詳細的介紹。
 

 

工業微生物菌種選育的步驟:

  1、采樣
 
  采樣地點的確定要根據篩選的目的、微生物的分布概況及菌種的主要特征與外界環境關系等,進行綜合、具體地分析來決定。如果預先不了解某種生產菌的具體來源,一般可從土壤中分離。
 
  采樣的方法多是在選好地點后,用小鏟去除表土,取離地面5-15厘米處的土壤幾十克,盛入預先消毒好的牛皮紙袋或塑料袋中,扎好,記錄采樣時間、地點、環境情況等,以備考查。
 
  2、增殖培養
 
  收集到的樣品,如含目標工業微生物菌種較多,可直接進行分離。如果樣品含目標菌種很少,就要設法增加該菌的數量,進行增殖培養。所謂增殖培養就是給混合菌群提供一些有利于所需菌株生長或不利于其它菌型生長的條件,以促使目標菌株大量繁殖,從而有利于分離它們。
 
  3、純種分離
 
  通過增殖培養還不能得到微生物菌種的純種,因為生產菌在自然條件下通常是與各種菌混雜在一起的,所以有必要進行分離純化,才能獲得純種。純種分離方法常選用單菌落分離法。把菌種制備成單孢子或單細胞懸浮液,經過適當的稀釋后,在瓊脂平板上進行劃線分離。
 
  4、生產性能的測定
 
  由于純種分離后,得到的工業微生物菌種數量非常大,如果對每一菌株都作全面或精確的性能測定,工作量十分巨大,而且是不必要的。一般采用兩步法,即初篩和復篩,經過多次重復篩選,直到獲得1-3株較好的菌株,供發酵條件的摸索和生產試驗,進而作為育種的出發菌株。
 

 

微生物菌種分離和純化的方法:

  1、傾注平板法
 
  首先把微生物菌種的懸液通過稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營養瓊脂培養基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養。單一細胞經過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復上述步驟數次,便可得到純培養物。
 
  2、涂布平板法
 
  首先把微生物菌種的懸液通過適當的稀釋,取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上,然后用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養基表面上,經恒溫培養便可以得到單個菌落。
 
  3、平板劃線法
 
  平板劃線法非常簡單的分離微生物菌種的方法,用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多,常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。
 
  當接種環在培養基表面上往后移動時,接種環上的菌液逐漸稀釋,然后在所劃的線上分散著單個細胞,經培養,每一個細胞長成一個菌落。
 

 
  綜上所述,在看完文章之后,大家對于微生物菌種的相關知識應該都有了一個了解了,如果大家還有什么疑惑的話,可以隨時來咨詢我們!

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